維生素B12（VB12）
抗體參數(shù)
| 名稱 | 維生素B12抗體（VB12 antibody） | ||
| 貨號 | H835e1 | ||
| 類型 | 單克隆抗體 | ||
| 宿主 | 兔 | ||
| 反應(yīng)物種 | 人 | ||
| 應(yīng)用平臺(tái) 推薦配對 |
化學(xué)發(fā)光（AE） | 化學(xué)發(fā)光（ALP） | 免疫層析 |
| C1770（捕獲）-H835e1（檢測） | H835e1（捕獲）-C1716（檢測） | H835e1（捕獲）-C1750（檢測） | |
| 純度 | Protein A/G純化，純度>95% | ||
| 緩沖液 | 1xPBS，pH 7.4 | ||
| 儲(chǔ)存 | -20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復(fù)凍融 | ||
抗原參數(shù)
| 名稱 | 內(nèi)因子（IF） | ||
| 貨號 | C1716 | C1750 | C1770 |
| 種屬 | 豬 | ||
| 類型 | 重組 | ||
| 標(biāo)簽 | His | ||
| 表達(dá)系統(tǒng) | 真核 | ||
| SDS-PAGE |  |
 |
 |
| 純度 | >90%，評估來源于R250染色的SDS-PAGE膠 | ||
| 緩沖液 | 1xPBS，pH 7.4 | ||
| 儲(chǔ)存 | -80℃分裝保存，避免反復(fù)凍融 | ||
發(fā)光大包裝試劑
| 名稱 | 貨號 | 推薦平臺(tái) | 方法學(xué) |
| 維生素B12（VB12）發(fā)光大包裝試劑 | Q801a1 | 化學(xué)發(fā)光（AE） | 夾心法 |
| Q801a2 | 化學(xué)發(fā)光（ALP） |
南京歐凱生物推出全新Vitamin B12夾心檢測產(chǎn)品，該系列發(fā)光大包裝試劑突破性整合傳統(tǒng)5組分，首次采用3組分體系。Okaybio技術(shù)團(tuán)隊(duì)通過優(yōu)化反應(yīng)時(shí)序，檢測流程較傳統(tǒng)方案縮短30%，有效提升檢測效率。經(jīng)驗(yàn)證該系列夾心檢測原料在化學(xué)發(fā)光平臺(tái)的檢測靈敏度可達(dá)5pg/mL，與羅氏樣本符合率>0.95。
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
1.校準(zhǔn)曲線
用VB12抗體（H835e1）和內(nèi)因子（C1770）檢測濃度范圍為0~2000pg/mL的VB12小分子純品。
圖1.VB12校準(zhǔn)曲線
| 編號 | 濃度（pg/mL） | RLU |
| 1 | 0.0 | 8308 |
| 2 | 22.2 | 64128 |
| 3 | 52.3 | 109666 |
| 4 | 499.5 | 957793 |
| 5 | 1004.1 | 2084186 |
| 6 | 2015.4 | 4067850 |
表1.VB12校準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)
2.樣本符合率
用VB12抗體（H835e1）和內(nèi)因子（C1770）檢測48例羅氏賦值樣本（濃度范圍35.1~1934pg/mL），信號梯度明顯，樣本符合率（R2）為0.9926。
圖2. VB12樣本符合率（羅氏賦值）
| 編號 | 樣本濃度（pg/mL） | 檢測濃度（pg/mL） |
| 1 | 35.1 | 43.8 |
| 2 | 36.2 | 32.4 |
| 3 | 54.3 | 59.8 |
| ? | ? | ? |
| 47 | 1872 | 1931 |
| 48 | 1934 | 1889 |
表2. VB12樣本符合率數(shù)據(jù)（羅氏賦值）
3.最低檢測限
| 校準(zhǔn)品 | 濃度（pg/mL） | RLU平均值 | 線性方程 |
| S1 | 0 | 8308 | y=2514.4x+8308 |
| S2 | 22.2 | 64128 | |
| 20次零濃度檢測RLU均值 | 8701 | ||
| SD | 427.7 | ||
| 平均值+2SD | 9556 | ||
| 最低檢測限（pg/mL） | 0.496 | ||
表3. VB12最低檢測限
4.特異性
用10mM PBS稀釋VB12、腺苷鈷胺（AdoCbl）、羥鈷胺（HOCbl）、甲鈷胺（MeCbl）抗原至500、2000pg/mL后上樣檢測。
圖3. VB12抗體識別特異性
| 理論濃度（pg/mL） | 檢測濃度（pg/mL） | |||
| VB12 | AdoCbl | HOCbl | MeCbl | |
| 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 500 | 499 | 487 | 705 | 656 |
| 2000 | 2015 | 1615 | 1943 | 2224 |
表4. VB12抗體識別特異性數(shù)據(jù)
5.重復(fù)性
利用同一批VB12抗體（H835e1）和內(nèi)因子（C1770）對濃度為50.26pg/mL和523.7pg/mL的羅氏賦值樣本各重復(fù)檢測10次，其測量濃度變異系數(shù)（CV）均小于3%。
| 低值樣本 | ||
| 測定值編號 | RLU | 濃度（pg/mL） |
| 1 | 107100 | 50.26 |
| 2 | 107866 | 50.87 |
| 3 | 107502 | 50.58 |
| 4 | 107213 | 50.35 |
| 5 | 107112 | 50.27 |
| 6 | 108017 | 50.99 |
| 7 | 106987 | 50.17 |
| 8 | 106547 | 49.82 |
| 9 | 104710 | 48.36 |
| 10 | 108306 | 51.22 |
| 平均值 | 107136 | 50.29 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | / | 0.80 |
| CV | 1.6% | |
表5. VB12檢測重復(fù)性（低值）
| 高值樣本 | ||
| 測定值編號 | RLU | 濃度（pg/mL） |
| 1 | 991892 | 514.2 |
| 2 | 1010307 | 522.4 |
| 3 | 1003793 | 519.5 |
| 4 | 1037952 | 534.7 |
| 5 | 1009633 | 522.1 |
| 6 | 1074624 | 551.0 |
| 7 | 1041325 | 536.2 |
| 8 | 986505 | 511.8 |
| 9 | 1026037 | 529.4 |
| 10 | 1033005 | 532.5 |
| 平均值 | 1021507 | 527.4 |
| 標(biāo)準(zhǔn)差 | / | 11.79 |
| CV | 2.2% | |
表6.VB12檢測重復(fù)性（高值）
試用申請
項(xiàng)目介紹
巨幼細(xì)胞性貧血屬于營養(yǎng)性貧血，《營養(yǎng)性貧血臨床路徑（2016年縣級醫(yī)院版）》及《巨幼細(xì)胞性貧血臨床路徑（2016年）》均指出巨幼細(xì)胞性貧血實(shí)驗(yàn)室檢查的評定指標(biāo)為血清葉酸測定（放射免疫法）＜6.91nmol/L（<3ng/mL）；和/或血清維生素B12（放射免疫法）＜74~103pmol/L（100~140ng/mL）；如果是大細(xì)胞性貧血，MCV＞100fl，多數(shù)紅細(xì)胞呈大卵圓形，網(wǎng)織紅細(xì)胞常減低。血清葉酸、維生素B12水平為住院患者的必查項(xiàng)目；在營養(yǎng)缺乏病因未根治時(shí)，仍需持續(xù)監(jiān)測血常規(guī)、血清鐵、葉酸及維生素B12水平。治療巨幼細(xì)胞性貧血時(shí)需注意，對于單純維生素B12缺乏的患者，如果單用葉酸治療會(huì)加重維生素B12的缺乏，特別要警惕會(huì)有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的發(fā)生或加重。
依據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY∕T 1677-2019，維生素B12測定試劑盒（標(biāo)記免疫分析法）檢出限應(yīng)≤145pg/mL；線性區(qū)間不窄于[150，1000]pg/mL，在線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.990。對濃度≤250pg/mL和[400，700]pg/mL樣本重復(fù)測定時(shí)CV≤10%，批間CV≤15%。以上標(biāo)準(zhǔn)不適用于膠體金或其他方法標(biāo)記的定性或半定量VB12檢測試劑。
相關(guān)產(chǎn)品
蘇公網(wǎng)安備32011202001302